วัตถุประสงค์การใช้งาน

การทดสอบ Dengue NS1 Ag-IgG/IgM Combo เป็นการตรวจด้วยวิธีโครมาโตกราฟีแบบรวดเร็วสำหรับการตรวจหาแอนติบอดี (IgG และ IgM) ในเชิงคุณภาพ และแอนติเจน NS1 ของไวรัสไข้เลือดออกต่อไวรัสไข้เลือดออกในซีรั่มหรือพลาสมา เพื่อช่วยในการวินิจฉัยการติดเชื้อไวรัสไข้เลือดออก

[สรุป]

ไข้เลือดออกเป็นโรคติดเชื้อเฉียบพลันที่มีพาหะนำโรค เกิดจากไวรัสไข้เลือดออกที่ติดต่อโดยยุงการติดเชื้อไวรัสไข้เลือดออกสามารถทำให้เกิดการติดเชื้อแบบถอย ไข้เลือดออก ไข้เลือดออก ไข้เลือดออกได้อาการทางคลินิกโดยทั่วไปของไข้เลือดออก ได้แก่ มีอาการเฉียบพลัน มีไข้สูง ปวดศีรษะ กล้ามเนื้อรุนแรง ปวดกระดูกและข้อ ผื่นที่ผิวหนัง แนวโน้มมีเลือดออก ต่อมน้ำเหลืองโต จำนวนเม็ดเลือดขาวลดลง ภาวะเกล็ดเลือดต่ำ และอื่นๆ ในผู้ป่วยบางรายโรคนี้โดยพื้นฐานแล้วเป็นที่นิยมในเขตร้อนและกึ่งเขตร้อน เนื่องจากโรคนี้แพร่เชื้อโดยยุงลาย Aides เหตุผลที่ความนิยมมีบางอย่างตามฤดูกาล โดยทั่วไปจะมีทุกปีในเดือนพฤษภาคม ~ พฤศจิกายน จุดสูงสุดคือในเดือนกรกฎาคม ~ กันยายนในพื้นที่ที่มีการแพร่ระบาดใหม่ โดยทั่วไปประชากรจะอ่อนแอ แต่อุบัติการณ์ส่วนใหญ่จะเป็นผู้ใหญ่ ในพื้นที่ที่มีการระบาด อุบัติการณ์ส่วนใหญ่เป็นเด็ก

หลักการ

การทดสอบ Dengue NS1 Ag-IgG/IgM Combo เป็นการตรวจอิมมูโนแอสเสย์แบบแถบเมมเบรนเชิงคุณภาพ สำหรับการตรวจหาแอนติบอดีของไวรัสไข้เลือดออก (IgG และ IgM) และแอนติเจน NS1 ของไวรัสไข้เลือดออกในซีรั่มหรือพลาสมา

สำหรับการทดสอบ IgG/IgM : อุปกรณ์ทดสอบประกอบด้วย: 1) แผ่นคอนจูเกตสีเบอร์กันดีที่มีแอนติเจนของซองจดหมายชนิดรีคอมบิแนนท์จากไข้เลือดออกที่คอนจูเกตด้วยทองคำคอลลอยด์ (คอนจูเกตของไข้เลือดออก) 2) แถบเมมเบรนไนโตรเซลลูโลสที่มีเส้นทดสอบสองเส้น (เส้น T1 และ T2) และ สายควบคุม (สาย C)สาย T1 เคลือบด้วยแอนติบอดีไว้ล่วงหน้าสำหรับการตรวจหา IgM ต้านไข้เลือดออก ส่วนสาย T2 เคลือบด้วยแอนติบอดีสำหรับการตรวจหา IgG ต้านไข้เลือดออกเมื่อจ่ายชิ้นงานทดสอบในปริมาณที่เพียงพอลงในหลุมตัวอย่างของตลับทดสอบ ชิ้นงานจะเคลื่อนที่โดยการกระทำของเส้นเลือดฝอยทั่วตลับทดสอบสารต้านไข้เลือดออก IgG หากมีอยู่ในตัวอย่าง จะจับกับคอนจูเกตไข้เลือดออกจากนั้นอิมมูโนคอมเพล็กซ์จะถูกจับโดยรีเอเจนต์ที่เคลือบไว้ล่วงหน้าบนแถบ T2 ทำให้เกิดเส้น T2 สีแดงเบอร์กันดี ซึ่งบ่งชี้ผลการทดสอบเชิงบวกของไข้เลือดออก IgG และบ่งชี้ว่ามีการติดเชื้อครั้งล่าสุดหรือซ้ำIgM ต้านไข้เลือดออก หากมีอยู่ในตัวอย่างจะจับกับคอนจูเกตไข้เลือดออกจากนั้นอิมมูโนคอมเพล็กซ์จะถูกจับโดยรีเอเจนต์ที่เคลือบบนเส้น T1 ทำให้เกิดเป็นเส้น T1 สีแดงเบอร์กันดี ซึ่งบ่งชี้ผลการทดสอบเชิงบวกของไข้เลือดออก IgM และบ่งบอกถึงการติดเชื้อครั้งใหม่การไม่มีเส้น T ใดๆ (T1 และ T2) แสดงให้เห็นผลลัพธ์ที่เป็นลบ

สำหรับการทดสอบ NS1: ในขั้นตอนการทดสอบนี้ แอนติบอดี NS1 ต้านไข้เลือดออกจะถูกตรึงไว้ในบริเวณสายทดสอบของคาสเซ็ตหลังจากวางตัวอย่างเลือดครบ /ซีรั่ม / พลาสมาลงในบ่อของตัวอย่าง ตัวอย่างจะทำปฏิกิริยากับอนุภาคที่เคลือบด้วยแอนติบอดีต้านไข้เลือดออก NS1 ​​ซึ่งถูกนำไปใช้กับแผ่นทดสอบของผสมนี้จะเคลื่อนตัวทางโครมาโทกราฟีตามความยาวของแถบทดสอบ และทำปฏิกิริยากับแอนติบอดีต้านไข้เลือดออก NS1 ​​ที่ถูกตรึงไว้หากตัวอย่างมีแอนติเจน NS1 ของไวรัสไข้เลือดออก เส้นสีจะปรากฏขึ้นในบริเวณเส้นทดสอบซึ่งบ่งชี้ว่าผลเป็นบวกหากตัวอย่างไม่มีแอนติเจน NS1 ของไวรัสไข้เลือดออก เส้นสีจะไม่ปรากฏในบริเวณนี้ซึ่งบ่งชี้ว่าผลเป็นลบ

เพื่อทำหน้าที่เป็นตัวควบคุมขั้นตอน เส้นสีจะปรากฏที่บริเวณเส้นควบคุมเสมอเพื่อระบุว่ามีการเพิ่มปริมาตรของชิ้นงานทดสอบที่เหมาะสมและเกิดการดูดซับของเมมเบรน

การจัดเก็บและความเสถียร

จัดเก็บเป็นบรรจุภัณฑ์ในถุงปิดผนึกที่อุณหภูมิห้องหรือในตู้เย็น (4-30°C หรือ 40-86°F)อุปกรณ์ทดสอบมีความเสถียรจนถึงวันหมดอายุซึ่งพิมพ์อยู่บนซองที่ปิดสนิท

การทดสอบจะต้องอยู่ในซองที่ปิดสนิทจนกว่าจะใช้งาน

การเก็บตัวอย่างและการเตรียมตัวอย่าง

1. สามารถใช้การทดสอบ Dengue NS1 Ag-IgG/IgM Combo บนเซรั่มหรือพลาสมาได้

2. เพื่อเก็บตัวอย่างเลือด ซีรั่ม หรือพลาสมาตามขั้นตอนห้องปฏิบัติการทางคลินิกตามปกติ

3. ควรทำการทดสอบทันทีหลังจากเก็บตัวอย่างอย่าทิ้งตัวอย่างไว้ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลานานสำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ควรเก็บตัวอย่างไว้ที่อุณหภูมิต่ำกว่า 20°C

4. นำตัวอย่างไปไว้ในอุณหภูมิห้องก่อนทำการทดสอบตัวอย่างแช่แข็งจะต้องละลายให้หมดและผสมให้เข้ากันก่อนการทดสอบตัวอย่างไม่ควรแช่แข็งและละลายซ้ำๆ

กระบวนการทดสอบ

ปล่อยให้การทดสอบ ตัวอย่าง บัฟเฟอร์ และ/หรือส่วนควบคุมมีอุณหภูมิห้อง 15-30°C (59-86°F) ก่อนการทดสอบ

1. นำซองไปวางที่อุณหภูมิห้องก่อนเปิดนำอุปกรณ์ทดสอบออกจากซองที่ปิดสนิทแล้วใช้งานโดยเร็วที่สุดวางอุปกรณ์ทดสอบบนพื้นผิวที่สะอาดและได้ระดับ

2. สำหรับการทดสอบ IgG/IgM :ถือหยดในแนวตั้งและถ่ายโอนชิ้นงานทดสอบ 1 หยด (ประมาณ 10μl) ไปยังหลุมชิ้นงานทดสอบ (S) ของอุปกรณ์ทดสอบ จากนั้นเติมบัฟเฟอร์ 2 หยด (ประมาณ 70μl) แล้วเริ่มจับเวลาดูภาพประกอบด้านล่าง

3. สำหรับการทดสอบ NS1: จับหยดในแนวตั้งแล้วถ่ายซีรั่มหรือพลาสมา 8~10 หยด (ประมาณ 100μl) ไปยังบ่อชิ้นงานทดสอบ (S) ของอุปกรณ์ทดสอบ จากนั้นเริ่มจับเวลาดูภาพประกอบด้านล่าง

4. รอให้เส้นสีปรากฏขึ้นอ่านผลลัพธ์ในเวลา 15 นาทีอย่าตีความผลลัพธ์หลังจากผ่านไป 20 นาที

การตีความผลลัพธ์

เชิงบวก:

สำหรับการทดสอบ IgG/IgM: เส้นควบคุมและเส้นทดสอบอย่างน้อยหนึ่งเส้นปรากฏบนเมมเบรนการปรากฏตัวของสายทดสอบ T2 บ่งชี้ว่ามีแอนติบอดี IgG ที่จำเพาะต่อไข้เลือดออกการปรากฏตัวของสายทดสอบ T1 บ่งชี้ว่ามีแอนติบอดี IgM ที่จำเพาะต่อไข้เลือดออกและหากทั้งเส้น T1 และ T2 ปรากฏขึ้น แสดงว่ามีทั้งแอนติบอดี IgG และ IgM ที่จำเพาะต่อไข้เลือดออกยิ่งความเข้มข้นของแอนติบอดีต่ำ เส้นผลลัพธ์ก็จะยิ่งอ่อนลง

สำหรับการทดสอบ NS1: มีบรรทัดสองบรรทัดปรากฏขึ้นบรรทัดหนึ่งควรปรากฏในขอบเขตของเส้นควบคุม (C) เสมอ และอีกเส้นหนึ่งที่มีสีชัดเจนควรปรากฏในขอบเขตของเส้นทดสอบ

เชิงลบ:

เส้นสีหนึ่งเส้นปรากฏขึ้นในพื้นที่ควบคุม (C) ไม่มีเส้นสีที่ชัดเจนปรากฏขึ้นในพื้นที่เส้นทดสอบ

ไม่ถูกต้อง: บรรทัดควบคุมไม่ปรากฏปริมาตรของชิ้นงานทดสอบไม่เพียงพอหรือเทคนิคขั้นตอนที่ไม่ถูกต้องเป็นสาเหตุที่เป็นไปได้มากที่สุดที่ทำให้สายควบคุมล้มเหลวทบทวนขั้นตอนและทำการทดสอบซ้ำด้วยอุปกรณ์ทดสอบใหม่หากปัญหายังคงอยู่ ให้หยุดใช้ชุดทดสอบทันทีและติดต่อตัวแทนจำหน่ายในพื้นที่ของคุณ